产品货号:
HR0334
中文名称:
Lowry蛋白定量试剂盒
英文名称:
产品规格:
250T|1000T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒在1~1500μg/mL蛋白浓度范围内有较好的线性关系。
在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物,Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被复合物蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深蓝色,在一定的条件下,蓝色深度与蛋白的量成正比,可根据750nm的光吸收值大小计算蛋白质的含量。
保存:按标签指示条件保存,有效期1年。
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在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物,Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被复合物蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深蓝色,在一定的条件下,蓝色深度与蛋白的量成正比,可根据750nm的光吸收值大小计算蛋白质的含量。
组分 | 250T | 1000T | 保存 |
蛋白标准(5mg/mL) | 1mL | 1mL×2 | -20℃ |
试剂A | 50mL | 100mL×2 | 2~8℃ |
试剂B | 1mL | 4mL | |
Folin-Ciocalteu试剂 | 5mL | 20mL |
保存:按标签指示条件保存,有效期1年。
- 在低温条件或长期保存出现沉淀时,可搅拌或37℃温育使溶解,如发现细菌污染则应丢弃。
- 许多干扰物质会降低颜色反应。
- 使用孵育时,应注意防止因水份蒸发影响检测结果。
- 96孔酶标板测定
- 定量工作液配制
根据样品数量,按50体积试剂A加1体积试剂B(50:1)配制适量定量工作液,充分混匀。 - 蛋白标准工作液配制
将蛋白标准储存液用双蒸水5倍稀释,配成1mL/ml的工作液。 - 标准曲线绘制。取一块酶标板,按以下表格数据加入试剂:
孔号 0 1 2 3 4 5 6 7 蛋白标准(μL) 0 1 2 4 8 12 16 20 去离子水(μL) 20 19 18 16 12 8 4 0 定量工作液(μL) 200 200 200 200 200 200 200 200 混匀后室温放置10分钟 Folin-Ciocalteu试剂 20 20 20 20 20 20 20 20 对应的蛋白含量(μg) 0 1 2 4 8 12 16 20 对应的蛋白浓度(μg/μL) 0 0.05 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1 - 加入Folin-Ciocalteu试剂振荡混匀后,室温放置30分钟。
- 用酶标仪测定A750,以不含BSA的光吸收值为空白对照。
- 以蛋白含量(μg)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。
- 样品测定:将待测蛋白样品用去离子水稀释至适当浓度,取20μL样品,加入200μL工作液C,混匀后室温放置10分钟,然后加入20μL Folin-Ciocalteu试剂,混匀后室温放置30分钟。
- 以0号孔为对照,测定样品吸收值A750。
- 根据测得的吸收值,在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。
- 计算蛋白浓度:以查得的蛋白含量乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度。
- 定量工作液配制
- 比色皿测定
按照比色皿规格,与以上方法相同,适当按比例增加各溶液体积即可。
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